影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）携手蜘蛛格温（海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音），穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命，迈尔斯誓言打破命运魔咒，找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099（奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音）所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突，一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响！
白石晴香,小林亲弘,伊藤静,永濑安奈,井上穗乃花,山根绮,茅野爱衣,日高里菜,中原麻衣,千本木彩花,富田美忧,福岛润,大塚芳忠,玄田哲章,田村睦心,田村由香里,杉田智和
松尾骏,津田美波
花江夏树,谷山纪章,阿座上洋平,古川慎,小野贤章,柿原彻也,梶裕贵,高桥广树,中井和哉,寿美菜子,松风雅也,土屋神叶
下野纮,伊藤加奈惠,早见沙织,名冢佳织,东山奈央,竹达彩奈,阿澄佳奈,花泽香菜,井口裕香,高垣彩阳,户松遥
